本文提到的手性柱均為涂敷型 ,所以很多溶劑都會對色譜填料造成不可逆的損傷。凡是說明書中沒有提到的溶劑流動相,請不要使用。通常情況下,用正己烷，乙醇和異丙醇為流動相；te殊情況下，可以用到甲醇和乙腈,但是需要充分過渡儀器和手性柱,同時嚴格控制流動相的混合比例。各手性柱對甲醇乙腈的比例要求不同,請參閱各自的英文版說明書。正相手性柱不能使用水作為流動相， 也不能用水溶解樣品。否則柱子也會受到損傷。

大賽璐手性柱zui大耐壓為30Mpa (300Bar)。為了延長手性柱的使用壽命,建議使用壓力如下:

粒徑10um手性柱：建議8Mpa下使用；粒徑5um手性柱：建議在10Mpa下使用；粒徑3um手性柱：建議在15Mpa下使用

流動相的成分、比例不同，則粘度不同，更換流動相時，需要相應地調整流速，以防止柱壓過高。 在使用前yi定要che底清洗儀器管路、正確選擇流動相。

1.使用前(在連接該手性柱進行實驗前，請按以下步驟操作):

1.1確認儀器各部件狀態：校準各泵的流速看是否準確。

1.2使用溶劑及配制：使用的有機溶劑(流動相)均為色譜級。配制流動相時,請充分振蕩混合均勻,并且超聲排除氣泡。

1.3 樣品的配制：樣品一般是溶解于流動相中進樣。個別情況下,也可以是正己烷和異丙醇(或乙醇)的等量混合溶劑中。如果使用非流動相溶解樣品，需要特別注意會出現樣品結晶析出的可能，一般表現為柱壓升高,峰型不對稱等。一般不能使用100的甲醇或Z腈溶解樣品。其它不能用作流動相的溶劑同樣不能用于溶解樣品。若樣品為油狀物，請在配樣前確認樣品里沒有殘留對柱子有損傷性的有機溶劑,例如乙酸z酯、二氯甲烷、三lvjia烷四氫呋喃和甲基叔丁基醚等。樣品不能溶解在水中。

1.4溶劑切換：請在連接色譜柱前，做好溶劑切換，根據HPLC系統中不同的當前流動相,采用不同的沖洗方法清洗所有管路:包括所有溶劑入口、泵、進樣管路與裝置和其他連接管路(用=通代替色譜柱連接流路沖洗色譜系統)，如果當前流動相是水相流動相(如水乙腈、緩沖液/甲醇)，要先用純水che底沖洗(約60mL )，以除去其中存在的有機溶劑或緩沖液,然后用100的異丙醇或乙醇che底沖洗(約60 mL)以置換掉純水。接下來,用流動相(通常是正己烷，異丙醇和乙醇；約30mL )沖洗儀器的整個

管路,以置換掉醇。最后連接上手性柱。如果當前系統是非水流動相(如烷烴類,異丙醇或Z醇)，則可以直接用流動相(通常是正己烷,異丙醇和乙醇)，沖洗儀器30mL，然后可以接上柱子。如果當前系統的流動相中含有一些會破壞正相柱的溶劑，如2酸乙酯，二氯甲烷和四氫呋喃等等),則需要用100的異丙醇或2醇(約60mL )沖洗儀器的所有管路,以置換掉對柱子有損傷性的溶劑；然后用實驗所需的流動相(通常是正己烷，異丙醇和乙醇；約30mL)過渡儀器。最后連接上手性柱。剛接上手性柱時,不要突然升高至zui大流速,建議先小流速沖洗柱子，再逐漸升高到實驗所需的zui適合流速。注意:對于管路比較多的HPLC儀器，建議其余未用的流路也bi須按照此步驟依次過渡，以免誤操作時讓其他溶劑進入系統，造成嚴重后果。若實驗所需的流動相不是正己烷、正庚烷、乙醇和異丙醇,而是其它流動相,請使用前仔細查看說明書或與我們確認。不同的流動相，過渡儀器的步驟不同。如果在連接手性柱至HPLC儀器之前，不嚴格按照本說明沖洗置換HPLC儀器系統的溶劑，色譜柱有可能在*次進樣之前就被破壞，-般表現為柱壓偏高，柱效嚴重下降:樣品甚至沒有保留，不能被分離等等。

2. 使用中：推薦使用保護柱。

3. 使用后:實驗結束后,根據使用的流動相體系,確認是否需要采用溶劑過渡色譜柱,然后按照說明書的保存方法，將色譜柱密封保存。