凝膠色譜柱的應(yīng)用越來越廣泛,使用過后正確地對(duì)色譜柱進(jìn)行保養(yǎng)才能使它的使用壽命更長jiu。那么,凝膠色譜柱應(yīng)該如何進(jìn)行清洗和保存呢?下面來簡(jiǎn)單介紹一下。
1.沖洗
凝膠色譜的流動(dòng)相一半多采用水或緩沖溶液,少數(shù)采用水與一些極性有機(jī)溶劑的混合溶液,除此之外,還有個(gè)別比較te殊的流動(dòng)相系統(tǒng),這要根據(jù)溶液分子的性質(zhì)來決定。加完樣品后,可將色譜床與洗脫液貯瓶及收集器相連,設(shè)置好一個(gè)適宜的流速,就可以定量地分布收 集洗脫液。然后根據(jù)溶質(zhì) 分子的性質(zhì)選擇光學(xué)、化學(xué)或生物學(xué)的方法進(jìn)行定性和定量測(cè)定。
2.再生
因?yàn)樵谀z色譜中凝膠與溶質(zhì)分子之間原則上不會(huì)發(fā)生任何作用,因此在一次分離后用流動(dòng)相稍加平衡就可以進(jìn)行下一次的色譜操作。但在實(shí)際應(yīng)用中常有yi定的污染物污染凝膠。對(duì) 已沉積于凝 膠床表面的不溶物可把表層凝膠曲調(diào), 在適當(dāng)增補(bǔ)一些新的溶漲膠,并進(jìn)行重新 平衡處理;如果整個(gè)柱有微量污染,LINaCI 溶液洗脫。在通常情況下,一根凝膠柱可使用半 年之久。凝膠柱若經(jīng)多次使用后,其色澤改變,流速降低,表面有污漬等就要對(duì)凝膠進(jìn)行再生處理。凝膠的再生是指用恰當(dāng)?shù)姆椒ǔツz中的污染物,使其恢復(fù)其原來的性質(zhì)。交聯(lián)葡萄糖凝 膠廠用溫?zé)岬?L 氫氧化鈉和 L 的氯化鈉和混合液浸泡,用水沖洗到中性;而對(duì)于聚丙烯酰胺和 瓊脂糖凝膠由于遇酸堿不穩(wěn)定,則常用鹽溶液浸泡,然后用水沖到中性。
3.保存
經(jīng)常使用的凝膠以濕態(tài)保存為主,為了避免凝膠床染菌,可加少許氯仿、苯*或硝基苯等化學(xué)物質(zhì),它可以使色譜柱放置幾個(gè)月至一年。凝膠的干燥應(yīng)先對(duì)凝膠進(jìn)行浮選,除去細(xì)小的 顆粒,并用 大量水洗,除去鹽和污染物,然后逐步增加一春濃度使凝膠收縮, 燥,在整個(gè)操作過程中的蒸餾水、器皿和房間bi須干凈 。瓊脂糖凝膠的干燥操作比較麻煩, 并且干燥后還 在 60~80 度干不容易溶張,所以一般仍以濕態(tài)保存為主。
